选择性辅助孵化是指根据母体以及每个胚胎自身的具体情况，选择自身孵化困难的胚胎，给予辅助性孵化。根据试管婴儿实验室临床实践表明，辅助孵化并不是对所有的病人和所有的胚胎都有提高植入率的作用，而仅是对于那些因某种原因导致自身孵化困难的胚胎有帮助，如透明带过厚的胚胎，透明带异常的胚胎，母体年龄偏大的病人，和FsH水平过高的病人等。由此，产生了选择性辅助孵化的概念。

　　选择性辅助孵化的成功率
　　选择性辅助孵化的成功率 与帮助透明带厚度和硬度异常的胚胎突破机械性屏障，以及帮助质量差而无足够能量完成自身孵化的胚胎突破透明带有关。针对因高龄或多次试管婴儿失败的不孕患者，其成功率可增加到原来的1.5倍。

　　辅助孵化技术流程
　　目前，实验研究人员开发的辅助孵化的方法有4种：机械法、酸化法、激光法和酶消化法。其中酸化法和机械法在临床应用广泛，尤其是酸化法;激光法因为需要特殊的设备，在临床上较少使用;酶消化法是近年来出现的一种新方法。据报道，酶消化法对囊胚的植入有明显的帮助，此方法的效果尚待更多的临床实践予以证实。

　　1.机械法
　　步 辅助孵化工作盘的制作
　　(1)用含有6%Plasmanate(商品化的人类血浆蛋白制剂)的HTF或PBS在Falcon1006盘中做小滴。根据待辅助孵化的胚胎数目决定小滴的数目。每个小滴的体积中l0入;
　　(2)在小滴上面覆盖约4 mL左右的经过处理的矿物油
　　(3)盖好盘盖后，将工作盘放人37℃培养箱预热待用，一般需在使用前30 min进行预热;
　　第二步 显微操作台的准备
　　将固定针安装在左手边的显微注射针支架上，将PZ针安装在右手边的显微注射针支架上。
　　第三步 机械法辅助孵化的操作过程
　　(1)将待辅助孵化的胚胎放人工作盘的小滴中，每滴中放1个，一次以放2个胚胎为宜，以免操作时间长，使胚胎过久地暴露于非培养环境中。
　　(2)将固定针降入小滴，让卵黄间隙较大的区域处于11点至1点处，在9点钟处用固定针将胚胎固定。
　　(3)将PZ针降入小滴，从胚胎的1点钟左右的部位进针，从11点左右的部位穿出。操作时严格避免伤及胚胎的细胞。
　　(4)将固定胚胎的固定针放松，从9点钟处移至：PZ针之上，用其反复磨擦PZ针.盲至透明带被穿透，PZ针脱出透明带，裂隙形成为止。
　　(5)将胚胎旋转90度，重复上述操作2次。终在透明带上形成两条十字交叉的裂隙。
　　第四步 将经过辅助孵化的胚胎在干净的培养液中清洗3次，然后放回原培养盘的小滴中或者ET盘中，等待胚胎移植

　　2.酸化法
　　酸化法是指使用Acid Tyde's Solution(简称AT Solution)溶解透明带，在透明带上形成一个直径约大于20gIm的小洞。
　　步 辅助孵化工作盘的制作
　　(1)用AT溶液在Falcon 1006盘的上方做一个10九的小滴，用红色记号笔在盘子底部将其圈起来，以示区别。
　　(2)用含有6%Plasmanate.的HTF或PBS在该盘的下部中做体积为10的小滴。小滴的数目等于待辅助孵化的胚胎的数目。
　　(3)在小滴上覆盖4mL左右的经过处理的矿物油。
　　(4)盖好盘盖后，将工作盘放入37℃培养箱预热待用，一般需在使用前30 min进行预热;
　　第二步 显微操作台的准备
　　(1)将固定针安装在左手边的显微注射针支架上。
　　(2)将固定针安装在右手边的显微注射针支架上，并与嘴吸控制装置相连接。
　　第三步 酸化辅助孵化的操作
　　(1)在透明带上打洞
　　1)将固定针降人AT小滴中，用嘴吸控制装置将AT溶液吸入holdingpipette，然后将固定针提出液面。
　　2)用固定针在胚胎的9点钟处将其固定，并使卵黄间隙较大的区域或者碎片较多的区域处于3点钟处。
　　3)将固定针置于胚胎的3点钟处，使用嘴吸控制装置小心地将AT溶液吹在透明带上，使其溶解，固定针在吹入AT溶液的同时，应做轻微的上下移动，使接触AT溶液的透明带的范围约200Um。
　　4)一旦透明带被溶解穿透，立即停止吹AT溶液并迅速小心地开始回吸，以对该区域的AT溶液进行清除。
　　5)继续用固定针固定胚胎，同时移动显微镜的载物台，使胚胎离开刚才的工作区域，减少酸与胚胎的接触。
　　(2)取出碎片对于含有碎片的胚胎，可利用刚刚在透明带上溶解出来的小洞，使用固定针将碎片吸出。进行此项操作时，严防伤害胚胎细胞或将胚胎细胞误吸出来。
　　第四步 酸化后胚胎的清洗
　　将经过酸化法辅助孵化的胚胎在干净的培养液中清洗3次后，放回原培养盘的小滴中或者ET盘中，等待移植。

　　3 酶消化法
　　近年来，有的试管婴儿中心为了避免酸溶液对胚胎造成的可能性伤害，用Pronast代替AT溶液在局部溶解透明带，以达到辅助孵化的目的。
　　随着囊胚植人受到越来越多的重视，有的中心采用在植入前将囊胚放入一定浓度的Pronas溶液中培养24 h，使得透明带完全被酶消化而消失，以促进囊胚的植入。

　　4 激光法
　　激光法是指采用激光光束在透明带上打洞，以起到辅助孵化的作用。
　　辅助孵化技术对胚胎植入率和妊娠率有改善作用，在许多试管婴儿中心的临床运用中都得到证实。但改善的程度在不同的试管婴儿中心差别很大。这与操作人员的经验和熟练程度，所采用的辅助孵化方法，以及针对不同病人是否选择了个性化治疗方案。