在决定某个胚胎是否需要进行辅助孵化时，通常考虑的因素包括：母体的年龄、fsh水平、IVF治疗史、胚胎自身质量、胚胎自身发育速度、透明带的厚度、均匀度以及形状。

1、透明带

(1)透明带的厚度：透明带的厚度大于13um的胚胎应予辅助性孵化；

(2)透明带的形状：当胚胎的形状不规则时，如椭圆形，常常提示透明带有某种功能上的缺陷。因此，胚胎形状不规则，通常是需要辅助孵化的指征；

(3)透明带的颜色：透明带的颜色偏深，如呈现偏棕色或偏深色，予以辅助性孵化。

2、母体的年龄

母体的年龄是考虑是否需要给予辅助性孵化的一个重要因素。随着母体年龄的增大，其胚胎的透明带通常会变厚变硬，失去弹性，造成胚胎自然孵化困难。同时，来自母体年龄较大的胚胎，其质量通常较差，也会给胚胎的自然孵化带来困难。有的试管婴儿诊所以母体年龄38岁为界，凡母体年龄38岁或大于38岁，其所有用于的胚胎都应给予辅助孵化。

3、胚胎的质量

对于质量较差，含有较多碎片的胚胎，其植入的能力通常较差。进行辅助性孵化之后，其植入能力也许有所提高。

4、胚胎的发育速度

发育速度迟缓的胚胎，其自然孵化能力常常减弱，孵化过程常常延迟。辅助性孵化之后，有助于胚胎保持与子宫内膜植入窗口开放时间的一致性。受精后第3d细胞数目仍少于6个的胚胎，经过辅助性孵化后，其植入率高于未经辅助性孵化的对照组。

5、做试管婴儿的不孕治疗史

对于曾有过失败的IVF治疗史的病人，应给予辅助性孵化治疗。因为，自然孵化失败很可能是导致他们IVF治疗失败的原因之一。

6、fsh水平

如果在周期的第3d，fsh水平过高(大于15miu/ml)，通常提示卵巢的功能状况较差。这类病人的透明带很可能会因为卵泡发育环境不良而结构异常或功能较差。辅助性孵化常常会提高这类胚胎的植入率。

7、冷冻胚胎

经过冷冻和解冻之后，胚胎的透明带会变硬。因此，冷冻胚胎是辅助性孵化的指征之一。

辅助孵化的方法及其操作中酸化法和机械法在临床七、应用广泛，尤其是酸化法;激光法因为需要特殊的设备，在临床上较少使用;酶消化法是近年来出现的一种新方法。